为评价桑黄 Sanghuangporus sanghuang 子实体醇提物对 SW620 结肠癌细胞的影响,用 alamarBlue®法测定细胞增殖率,用流式细胞术碘化丙啶(propidim iodide,PI)染色法和 2′,7′-dichlorofluorescin diacetate (H2DCFDA)染色法分别检测细胞早期凋亡率、细胞周期变化和活性氧(reactive oxygen species,ROS)释放量,结果表明桑黄子实体醇提物在12.5–100μg/mL 作用浓度下具有抑制 SW620 细胞增殖的作用,但对中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary cell,CHO)细胞和小鼠骨髓巨噬细胞的增殖无显著抑制作用;桑黄子实体醇提物能诱导 SW620 细胞凋亡,引起细胞周期变化,可降低 G0/G1 和 G2/M 期细胞数量,并呈现浓度梯度依赖性,ROS 实验结果提示桑黄子实体醇提物的促肿瘤细胞凋亡与ROS 释放相关。
探讨桑黄提取物(extractsfromphellinusigniarius,EPI)对裸鼠乳腺癌移植瘤细胞的凋亡作用和相关机制。
通过检测桑黄3种 提 取 物 对 H22荷瘤小鼠的抑瘤率,探讨桑黄提取物的抗肿瘤活性。方 法将SPF级昆明种小鼠随机分组后,于小鼠右前肢腋窝皮下接种 H22肝癌细胞,接种1d后,分别采用桑黄3种提取物的低、中、高 剂 量(100、500、1000mg·kg-1 ·d-1)灌 胃,以生理盐水和环磷酰胺为阴性和阳性对照,连 续 给 药10d。实验期间每天测定各组小鼠的体质量;给 药10d后处死小鼠测瘤质量,并计算各组抑瘤率。结 果 桑 黄3种提取物可以增加 H22荷瘤小鼠体质量。低、中、高剂量桑黄菌丝体多糖提取物对 H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为32.87%、57.08% 和 68.35%;低、中、高剂量桑黄子实体多糖提取物对 H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别 为 44.14%、52.81%和73.69%;低、中、高剂量桑黄发酵液多糖提取物对 H22荷瘤小鼠的抑瘤率分别为 49.16%、50.63% 和51.81%。
探讨桑黄提取物对荷瘤小鼠肿瘤生长和细胞免疫功能的影响及抗肿瘤作用最佳剂量的筛选。方 法 将清洁级 C57小鼠按体重随机分成 5 组, 分别为空白对照组、阴性对照组、高剂量组、中剂量组和低剂量组。建立 肝癌H22皮下移植瘤模型, 在普通饲料饲喂的基础上采用灌胃法, 空白对照组和阴性对照组给以生理盐水, 高、中、低 剂量组分别给以不同剂量桑黄提取物, 观察其对肿瘤生长的影响; 利用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验检测巨噬 细胞功能, 乳酸脱氢酶法检测自然杀伤细胞( natural killer cell, NK) 活性, 噻唑蓝( MTT) 法检测 LAK 细胞( Lymphokine activated killer cell) 活性等细胞免疫功能的变化, 并观察其对脑、胸腺、肝、脾组织脏器指数的影响。结果 桑黄提取物 干预组与对照组相比, 在瘤体比、抑瘤率及细胞免疫功能方面均具差异有统计学意义, 对主要脏器的影响差异无统计 学意义, 其抗肿瘤作用的最佳剂量为 2 mg/ ( kg bw) 。
综合运用硅胶,Sephedax LH-20,RP-8,MCI 等柱色谱及硅胶薄层制备色谱,从桑黄子实体的 95% 乙醇提取物中分离纯化得到 11 个化合物,通过 NMR 和 MS 解析技术鉴定为 3α-羟基木栓烷-2-酮( 1) ,3-羟基木栓烷-3-烯-2-酮( 2) ,麦角甾-4,6,8 ( 14) ,22-四烯-3-酮( 3) ,麦角甾醇过氧化物( 4) ,尿嘧啶( 5) ,尿嘧啶核苷( 6) ,4-( 3,4-二羟苯基) -3-丁烯-2-酮( 7) ,原儿茶醛 ( 8) ,inotilone( 9) ,inoseavin A( 10) ,phellibaumin E( 11) ,其中化合物 1,2,5,6 为首次从该属真菌中分离得到。采用 Cell Titer- GLo ATP 荧光活性检测法,11 个化合物对 41 株离体肿瘤细胞和 2 株正常仓鼠细胞高通量筛选,结果显示化合物 2 ~ 4 对髓性白血病细胞系 NOMO-1 和 SKM-1 效果较好,其中化合物 2,3 体现出较好的选择性( 对 NOMO-1 的 IC50 分别为 0. 795 5,1. 828 μmol·L
观察桑黄多糖对荷瘤小鼠的抑瘤效应并探讨其作用机理。 方法:建立小鼠肝癌 ( H22 ) 、肉瘤 ( S180 ) 和肺癌 ( Lew- is)模型, 测定桑黄多糖对小鼠肿瘤的抑制作用。 通过对巨噬细胞 ( MΥ)功能和肿瘤坏死因子 ( TNF-α)的测定, 探讨其对免疫功能的 影响。
综述桑黄多糖的抗肿瘤机制及研究进展。桑黄多糖的抗肿瘤机制主要表现在免疫调节、抗血管生成、抗氧化三方面; 桑黄多糖与环磷酰胺联合用药能够增强疗效,降低副作用。